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測(cè)定植物過(guò)氧化氫酶活性的方法較多，包括紫外吸收法、化學(xué)滴定法、分光光度法、氧電極法、極譜法等。 1.紫外吸收法：利用過(guò)氧化氫在 240nm 波長(zhǎng)下有強(qiáng)烈吸收，而酶促反應(yīng)后過(guò)氧化氫減少，吸光度下降，通過(guò)吸光度變化計(jì)算酶活性。 2.化學(xué)滴定法：以高錳酸鉀溶液滴定反應(yīng)后的剩余過(guò)氧化氫，根據(jù)高錳酸鉀用量計(jì)算酶活性。 3.分光光度法：在特定波長(zhǎng)下，通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)體系吸光度的變化來(lái)反映酶活性。 4.氧電極法：使用氧電極直接測(cè)定反應(yīng)中氧氣的生成量，從而確定酶活性。 5.極譜法：基于過(guò)氧化氫在電極上的氧化還原反應(yīng)，測(cè)定電流變化以計(jì)算酶活性。 不同的測(cè)定方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，在實(shí)際應(yīng)用中，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件和需求選擇合適的方法，以準(zhǔn)確測(cè)定植物過(guò)氧化氫酶的活性。

目前沒(méi)有一個(gè)固定的標(biāo)準(zhǔn)，要根據(jù)過(guò)氧化氫酶應(yīng)用來(lái)確定它的用量。

過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定你老師應(yīng)該在課堂教過(guò)你的只要寫(xiě)一點(diǎn)就可以了

過(guò)氧化氫酶的活性測(cè)定——紫外吸收法H2O2在240nm波長(zhǎng)下有強(qiáng)烈吸收，過(guò)氧化氫酶能分解過(guò)氧化氫，使反應(yīng)溶液吸光度(A240)隨反應(yīng)時(shí)間而降低。根據(jù)測(cè)量吸光率的變化速度即可測(cè)出過(guò)氧化氫酶的活性。紫外分光光度計(jì)；離心機(jī)；研缽；250ml容量瓶1個(gè)；0.5ml刻度吸管2支，2ml刻度吸管1支；10ml試管3支；恒溫水?。?.2mol/LpH7.8磷酸緩沖液（內(nèi)含1%聚乙烯吡咯烷酮）；0.1mol/LH2O2（用0.1mol/L高錳酸鉀標(biāo)定）。1.酶液提?。悍Q取新鮮小麥葉片或其它植物組織0.5g置研缽中，加入2～3ml4℃下預(yù)冷的pH7.0磷酸緩沖液和少量石英砂研磨成勻漿后，轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中，并用緩沖液沖洗研缽數(shù)次，合并沖洗液，并定容到刻度?；旌暇鶆?qū)⒘科恐?℃冰箱中靜置10min，取上部澄清液在4000rpm下離心15min，上清液即為過(guò)氧化氫酶粗提液。5℃下保存?zhèn)溆谩?.測(cè)定：取10ml試管3支，其中2支為樣品測(cè)定管，1支為空白管，按表40-2順序加入試劑。表40-2紫外吸收法測(cè)定H2O2樣品液配置表管號(hào)S1S2S3粗酶液(ml)0.20.20.2pH7.8磷酸(ml)1.51.51.5蒸餾水(ml)1.01.01.025℃預(yù)熱后,逐管加入0.3ml0.1mol/L的H2O2，每加完一管立即記時(shí)，并迅速倒入石英比色杯中，240nm下測(cè)定吸光度，每隔1min讀數(shù)1次，共測(cè)4min，待3支管全部測(cè)定完后，按下式計(jì)算酶活性。3.結(jié)果計(jì)算：以1min內(nèi)A240減少0.1的酶量為1個(gè)酶活單位（u）。過(guò)氧化氫酶活性(u/gFW/min)=式中A240=AS0－AS0—加入煮死酶液的對(duì)照管吸光值；AS1,AS2—樣品管吸光值；Vt—粗酶提取液總體積（ml）；V1—測(cè)定用粗酶液體積（ml）；FW—樣品鮮重（g）；0.1—A240每下降0.1為1個(gè)酶活單位（u）；t—加過(guò)氧化氫到最后一次讀數(shù)時(shí)間（min）。

雙氧水漂白時(shí)間的確定與溫度有關(guān)如果用冷漂法,從測(cè)定雙氧水消耗率看,溶液中含有氫離子，而過(guò)氧根在氫離子的作用下會(huì)生成氫氧根離子，其中氫離子濃度大于氫氧根離子濃度。.