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甘油三酯的測(cè)定方法與標(biāo)準(zhǔn)化研究　　血清甘油三酯/三酰甘油（TG）是一項(xiàng)重要的臨床血脂常規(guī)測(cè)定指標(biāo),特別是隨著對(duì)其致動(dòng)脈粥樣硬化（AS）作用研究的深入,TG作為冠心病的一項(xiàng)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素日益受到重視.但是目前血清TG測(cè)定及其臨床應(yīng)用尚存在很多問(wèn)題,如生物學(xué)變異,游離甘油對(duì)測(cè)定的影響,測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化系統(tǒng)不完善等等.本文僅對(duì)TG的生物化學(xué),測(cè)定方法與標(biāo)準(zhǔn)化,臨床意義等方面的近況作一簡(jiǎn)述.　　一,TG的生物化學(xué)　　TG又稱中性脂肪,由3分子脂肪酸和1分子甘油酯化而成,是體內(nèi)能量的主要來(lái)源.TG處于脂蛋白的核心,在血中以脂蛋白形式運(yùn)輸.除TG外,外周血中還存在甘油二酯,甘油一酯（兩者總和不足TG的3%）和游離甘油（FG）.各種脂蛋白中,乳糜微粒（CM）,極低密度脂蛋白（VLDL）及其殘粒被TG含量高,被統(tǒng)稱為富含TG脂蛋白（TRL）,也稱殘粒樣脂蛋白（RLP）.越來(lái)越多的臨床與實(shí)驗(yàn)證據(jù)提示,TRL在AS病因?qū)W中扮演重要角色,可能作用于AS病變?cè)缙?　　TG的代謝可分為外源性和內(nèi)源性兩條途徑.外源性途徑指食物中的TG在小腸內(nèi)水解成脂肪酸和甘油一酯,二酯后由腸粘膜吸收入細(xì)胞,再合成TG并與其他脂質(zhì)形成CM,通過(guò)淋巴系統(tǒng)入血.CM中的TG在脂蛋白脂肪酶（LPL）作用下水解為甘油和游離脂肪酸（FFA）,被細(xì)胞利用或貯存.高脂飲食后3～6h,血液中CM相關(guān)的TG達(dá)到峰值,脂肪的吸收速度因食物中脂肪的成分及個(gè)體差異而不同.內(nèi)源性代謝途徑指CM水解產(chǎn)物—CM殘粒以受體介導(dǎo)的形式被肝臟吸收,其衍生物和一些新組分合成VLDL.與CM水解類(lèi)似,VLDL分泌到血液后被LPL水解成殘粒,其中部分直接被肝吸收,分解,另一部分繼續(xù)水解形成中間密度脂蛋白（IDL）,最后生成LDL.VLDL的合成與水解受多種因素調(diào)節(jié),包括底物利用率,激素狀態(tài),水解酶的活性及一些特殊載脂蛋白輔因子的活性.　　二,TG測(cè)定的方法學(xué)　　血清TG測(cè)定方法一般可分為化學(xué)法,酶法和色譜法3大類(lèi).早期測(cè)定方法是以總脂質(zhì)與膽固醇和磷脂之差估算.化學(xué)法用有機(jī)溶劑抽提標(biāo)本中的TG,去除抽提液中磷脂等干擾物后,用堿水解（皂化）TG,以過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛,然后用顯色反應(yīng)測(cè)甲醛.比較準(zhǔn)確的是二氯甲烷-硅酸-變色酸法（VanHandel-Caslson法）,此法抽提完全,能去除磷脂及甘油干擾,變色酸顯色靈敏度高,顯色穩(wěn)定,至今還是美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心（CDC）的內(nèi)部參考方法.但因操作步驟繁多,技術(shù)要求高而不適于常規(guī)工作應(yīng)用.核素稀釋/氣相色譜/質(zhì)譜技術(shù)（ID/GC/MS）主要用作參考系統(tǒng)中決定性方法的建立及參考物質(zhì)的制備與定值,此法費(fèi)用昂貴,樣品處理復(fù)雜,難以推廣應(yīng)用.　　目前幾乎所有的臨床實(shí)驗(yàn)室都用酶法檢測(cè)血清TG水平,雖然方法各異,但一般都包括3個(gè)基本步驟[3,5～7]：用最合適的LPL水解TG生成甘油和FFA；接著是轉(zhuǎn)化,該步驟一般只用一種酶,例如甘油激酶,將甘油磷酸化以進(jìn)行下一步反應(yīng),或者生成中間待測(cè)物；最后是有色染料（常為醌亞胺等）或者紫外吸收物質(zhì)的形成,再通過(guò)分光光度法計(jì)算相應(yīng)的TG濃度.如脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶-過(guò)氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（GPO-PAP法）等.此法具有簡(jiǎn)便快速,微量,精密度高的優(yōu)點(diǎn),且特異性強(qiáng),易于達(dá)到終點(diǎn),線性范圍寬.用一步法測(cè)定的是血清總甘油酯（定義為T(mén)G和FG及少量甘油二酯,甘油一酯之和,習(xí)慣統(tǒng)稱為T(mén)G）.為了消除FG的干擾,中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)曾推薦GPO-PAP法的兩步酶法作為血清TG常規(guī)測(cè)定方法[7],該法不增加試劑成本和工作量,適合自動(dòng)化分析,由于試劑分成兩部分加入,對(duì)正確設(shè)置分析測(cè)定參數(shù)有較高要求.對(duì)此法能否去凈游離甘油方面有人提出質(zhì)疑.針對(duì)這一情況,近來(lái)中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)在《關(guān)于臨床血脂測(cè)定的建議》文件中建議酶法如GPO-PAP法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清TG的常規(guī)方法.普通臨床常規(guī)實(shí)驗(yàn)室可采用一步GPO-PAP法,有條件的實(shí)驗(yàn)室（如三級(jí)以上醫(yī)院）應(yīng)考慮開(kāi)展游離甘油的測(cè)定.

[編輯本段]甘油三酯的概念　　甘油三酯（Triglyceride,縮寫(xiě)TG）是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子.　　甘油三酯是人體內(nèi)含量最多的脂類(lèi),大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時(shí)肝臟,脂肪等組織還可以進(jìn)行甘油三酯的合成,在脂肪組織中貯存.　　結(jié)構(gòu)式更明晰

[編輯本段]甘油三酯相關(guān)疾病　　高甘油三酯血癥　　高甘油三酯血癥是一種異族性甘油三酯蛋白合成和降解障礙.　　.正常的甘油三酯水平：兒童＜l00mg/dL（1.13mmol/L）,成人＜150mg／dL（1.7mmol/L）　　.臨界性高甘油三酯血癥：250～500mg／dL（2.83-5.65mmol／L）　　.明確的高甘油三酯血癥：大于500mg／dL（5.65mmol／L）　　.生理：主要含有脂蛋白的甘油三酯為乳糜微粒：在進(jìn)食后狀態(tài)下,由腸道吸收飲食中的脂肪　　極低密度脂蛋白（VLDL）：在空腹?fàn)顟B(tài)下,由碳水化合物及脂肪酸在肝內(nèi)進(jìn)行內(nèi)源合成　　中等密度脂蛋白（IDL）：由乳糜微粒和VLDL降解形成　　分型　　基于脂蛋白類(lèi)型的不同,分為下列類(lèi)型　?、裥停喝槊游⒘Ｃ黠@升高,表現(xiàn)為高甘油三酯血癥和輕度升高的膽固醇.常出現(xiàn)在兒童期.臨床常伴發(fā)由胰腺炎,肝脾腫大,發(fā)疹性黃瘤和視網(wǎng)膜脂血癥引起的腹痛.不增加動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn),病因可為原發(fā)（常染色體隱性）也可為繼發(fā),如SLE,γ球蛋白發(fā)育不良　?、駻型：低密度脂蛋白升高.伴有高膽固醇,參見(jiàn)高膽固醇血癥　　ⅡB型：LDL及VLDL升高,伴有高膽固醇及高甘油三酯.動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)高.原發(fā)病包括幾種遺傳疾病,繼發(fā)原因包括甲狀腺功能低下,肝腎疾病,卟啉癥,多發(fā)性骨髓瘤　?、笮停篒DL升高（血β脂蛋白異常）,表現(xiàn)為高膽固醇,高甘油三酯,多數(shù)原發(fā)性病人為脫輔基蛋白Ez純合子異常,繼發(fā)原因?yàn)榧谞钕俟δ艿拖潞挺们虻鞍装l(fā)育不良　　Ⅳ型：VLDL升高,伴有高甘油三酯和輕度升高的膽固醇.某些情況下,動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)增加　?、跣停喝槊游⒘＜癡LDL升高,伴有明顯增高的甘油三酯和高膽固醇,因LPL或apo-C缺陷造成常染色體隱性,動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)增加　　注意：上述分級(jí)只是為了說(shuō)明此種疾病,很少涉及到遺傳性和發(fā)病機(jī)理.血漿脂蛋白在任何個(gè)體中都是隨時(shí)間變化的,這是一種可以預(yù)計(jì)到的現(xiàn)象,因?yàn)樵赩LDL和LDL的代謝和飲食對(duì)VLDL的作用之間存在有前體-生成物這樣的關(guān)系同一種疾病可導(dǎo)致多種不同的脂蛋白模式,而多種疾病又可引起同一種脂蛋白表型.　　高脂血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)　　目前,國(guó)內(nèi)一般以成年人空腹血清總膽固醇超過(guò)5.72毫摩爾/升,甘油三酯超過(guò)1.70毫摩爾/升,診斷為高脂血癥.將總膽固醇在5.2～5.7毫摩爾/升者稱為邊緣性升高.　　根據(jù)血清總膽固醇,甘油三酯和高密度脂蛋白-膽固醇的測(cè)定結(jié)果,通常將高脂血癥分為以下四種類(lèi)型：　?。?）高膽固醇血癥：血清總膽固醇含量增高,超過(guò)5.72毫摩爾/升,而甘油三酯含量正常,即甘油三酯＜1.70毫摩爾/升.（2）高甘油三酯血癥：血清甘油三酯含量增高,超過(guò)1.70毫摩爾/升,而總膽固醇含量正常,即總膽固醇

[編輯本段]甘油三酯化學(xué)組成　　TG又稱中性脂肪,由3分子脂肪酸和1分子甘油酯化而成,是體內(nèi)能量的主要來(lái)源.TG處于脂蛋白的核心,在血中以脂蛋白形式運(yùn)輸.除TG外,外周血中還存在甘油二酯,甘油一酯（兩者總和不足TG的3%）和游離甘油（FG）.各種脂蛋白中,乳糜微粒（CM）,極低密度脂蛋白（VLDL）及其殘粒被TG含量高,被統(tǒng)稱為富含TG脂蛋白（TRL）,也稱殘粒樣脂蛋白（RLP）.越來(lái)越多的臨床與實(shí)驗(yàn)證據(jù)提示,TRL在AS病因?qū)W中扮演重要角色,可能作用于AS病變?cè)缙?[編輯本段]甘油三酯的分解代謝　　脂肪組織中的甘油三酯在一系列脂肪酶的作用下,分解生成甘油和脂肪酸,并釋放入血供其它組織利用的過(guò)程,稱為脂動(dòng)員.　　在這一系列的水解過(guò)程中,催化由甘油三酯水解生成甘油二酯的甘油三酯脂肪酶是脂動(dòng)員的限速酶,其活性受許多激素的調(diào)節(jié)稱為激素敏感脂肪酶(hormonesensitivelipase,HSL).胰高血糖素,腎上腺素和去甲腎上腺素與脂肪細(xì)胞膜受體作用,激活腺苷酸環(huán)化酶,使細(xì)胞內(nèi)cAMP水平升高,進(jìn)而激活cAMP依賴蛋白激酶,將HSL磷酸化而活化之,促進(jìn)甘油三酯水解,這些可以促進(jìn)脂動(dòng)員的激素稱為脂解激素(lipolytichormones).胰島素和前列腺素等與上述激素作用相反,可抑制脂動(dòng)員,稱為抗脂解激素(antilipolytichormones).　　脂動(dòng)員生成的脂肪酸可釋放入血,與白蛋白結(jié)合形成脂酸白蛋白運(yùn)輸至其它組織被利用.但是,腦及神經(jīng)組織和紅細(xì)胞等不能利用脂肪酸,甘油被運(yùn)輸?shù)礁闻K,被甘油激酶催化生成3-磷酸甘油,進(jìn)入糖酵解途徑分解或用于糖異生.脂肪和肌肉組織中缺乏甘油激酶而不能利用甘油.[編輯本段]甘油三酯合成代謝　　人體可利用甘油,糖,脂肪酸和甘油一酯為原料,經(jīng)過(guò)磷脂酸途徑和甘油一酯途徑合成甘油三酯.　　1.甘油一酯途徑　　以甘油一酯為起始物,與脂酰CoA共同在脂酰轉(zhuǎn)移酶作用下酯化生成甘油三酯.　　2.磷脂酸途徑?　　磷脂酸即3磷酸-1,2-甘油二酯,是合成含甘油脂類(lèi)的共同前體.糖酵解的中間產(chǎn)物類(lèi)磷酸二羥丙酮在甘油磷酸脫氫酶作用下,還原生成α-磷酸甘油(或稱3-磷酸甘油)；游離的甘油也可經(jīng)甘油激酶催化,生成α-磷酸甘油(因脂肪及肌肉組織缺乏甘油激酶,故不能利用激離的甘油).α-磷酸甘油在脂酰轉(zhuǎn)移酶(acyltransferase)作用下,與兩分子脂酰CoA反應(yīng)生成3-磷酸.1,2甘油二酯即磷脂酸(phosphatidicacid).此外,磷酸二羥丙酮也可不轉(zhuǎn)為α-磷酸甘油,而是先酯化,后還原生成溶血磷脂酸,然后再經(jīng)酯化合成磷脂酸.　　磷脂酸在磷脂酸磷酸酶作用下,水解釋放出無(wú)機(jī)磷酸,而轉(zhuǎn)變?yōu)楦视投?它是甘油三酯的前身物,只需酯化即可生成甘油三酯.?　　甘油三酯所含的三個(gè)脂肪酸可以是相同的或不同的,可為飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸.?　　甘油三酯的合成速度可以受激素的影響而改變,如胰島素可促進(jìn)糖轉(zhuǎn)變?yōu)楦视腿?由于胰島素分泌不足或作用失效所致的糖尿病患者,不僅不能很好利用葡萄糖,而且葡萄糖或某些氨基酸也不能用于合成脂肪酸,而表現(xiàn)為脂肪的氧化速度增加,酮體生成過(guò)多,其結(jié)果是患者體重下降.此外,胰高血糖素,腎上腺皮質(zhì)激素等也影響甘油三酯的合成.[編輯本段]甘油三酯的分布　　不同組織甘油三酯合成特點(diǎn)　　不同的組織細(xì)胞中甘油三酯的合成各有特點(diǎn),下面主要討論肝臟,脂肪組織和小腸粘膜上皮細(xì)胞合成甘油三酯的特點(diǎn).?　　1）肝臟　　　肝臟可利用糖,甘油和脂肪酸作原料,通過(guò)磷脂酸途徑合成甘油三酯.脂肪酸的來(lái)源有脂動(dòng)員來(lái)的脂肪酸,由糖和氨基酸轉(zhuǎn)變生成的脂肪酸和食物中來(lái)的外源性脂肪酸(食物中脂肪消化吸收后經(jīng)血入肝的中短鏈脂肪酸,乳糜微粒殘余顆粒中脂肪分解生成的脂肪酸).　　肝細(xì)胞含脂類(lèi)物質(zhì)約4-7%,其中甘油三酯約占1/2,甘油三酯含量過(guò)高會(huì)引起脂肪肝,正常情況下,肝臟合成的甘油三酯和磷脂,膽固醇,載脂蛋白一起形成極低密度脂蛋白,分泌入血.若磷脂合成障礙或載脂蛋白合成障礙就會(huì)影響甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)出肝,引起脂肪肝.另外,若進(jìn)入肝臟的脂肪酸過(guò)多,合成甘油三酯的量超過(guò)了合成載脂蛋白的能力,也可引起脂肪肝.?

它的計(jì)算方法為：動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）=[血總膽固醇（TC）—高密度脂蛋白（HDL）]÷高密度脂蛋白（HDL）它的正常數(shù)值為＜4.如果一個(gè)人的動(dòng)脈硬化指數(shù)＜4,反映出動(dòng)脈硬化的程度不嚴(yán)重或在減輕,數(shù)值越小,動(dòng)脈硬化的程度就越輕,引發(fā)心腦血管病的危險(xiǎn)性就越低；如果動(dòng)脈硬化指數(shù)≥4,就說(shuō)明已經(jīng)發(fā)生了動(dòng)脈硬化,數(shù)值越大,動(dòng)脈硬化的程度就越重,發(fā)生心腦血管病的危險(xiǎn)性就越高.從這個(gè)公式上分析,要想把動(dòng)脈硬化指數(shù)降下來(lái),方法只有兩個(gè)：一個(gè)是降低總膽固醇,另一個(gè)是升高高密度脂蛋白.但是,如果靠一味地降低膽固醇來(lái)完成,顯然不妥當(dāng),因?yàn)榭偰懝檀际侨梭w重要的營(yíng)養(yǎng)成分之一,降的過(guò)低,會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)不良,免疫力低下,易患癌癥和精神抑郁癥,還會(huì)使血管彈性降低,發(fā)生出血性中風(fēng),特別是老年人更危險(xiǎn)；因此只有大幅度升高高密度脂蛋白（HDL）的水平,才能在總膽固醇正常的情況下,使動(dòng)脈硬化指數(shù)安全,可靠,有效地降下來(lái),且沒(méi)有毒副作用,所以說(shuō),升高高密度脂蛋白（HDL）是改善動(dòng)脈硬化,降低動(dòng)脈硬化指數(shù)的最根本方法